Les fragments libres de la protéine de pointe du SRAS-CoV-2 peuvent déclencher l’activation des plaquettes et la formation de caillots dans COVID-19

Les fragments libres de la protéine de pointe du SRAS-CoV-2 peuvent déclencher l’activation des plaquettes et la formation de caillots dans COVID-19

Dans une étude récente en cours d’examen dans la revue Journal of Hematology & Oncology et actuellement disponible sur le Place de la recherche* preprint server, les chercheurs ont étudié la présence de la protéine spike (SP) du coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2) dans les thrombi (ou caillots sanguins). Ils ont prélevé les thrombi chez des patients atteints de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) et présentant un accident vasculaire cérébral ischémique aigu (AIS) et un infarctus du myocarde aigu (AMI).

Study: Evidence of SARS-CoV-2 Spike protein on retrieved thrombi from COVID-19 patients. Image Credit: Kateryna Kon / ShutterstockÉtude : Mise en évidence de la protéine Spike du SRAS-CoV-2 sur les thrombi prélevés chez les patients atteints de la maladie COVID-19. Crédit image : Kateryna Kon / Shutterstock

Les patients atteints de la maladie COVID-19 souffrent souvent de complications thrombotiques. Cependant, la physiopathologie de la coagulopathie associée au COVID-19 est complexe et n’est pas entièrement élucidée. Des études ont découvert des fragments libres de SP dans le plasma des patients atteints de COVID-19. Bien que rare, le SARS-CoV-2 a été trouvé dans les thrombus extraits des artères cérébrales de patients atteints d’AIS et plus fréquemment dans les artères coronaires de patients atteints d’IAM.

En conséquence, les chercheurs ont testé l’hypothèse selon laquelle le SP active la cascade de coagulation en se liant à l’enzyme 2 de conversion de l’angiotensine (ACE2) directement sur les plaquettes et les cellules endothéliales. En outre, ils ont cherché à savoir si la SP circulante induit une hypercoagulabilité en interagissant directement avec la fibrine ou le fibrinogène.

À propos de l’étude

Dans l’étude actuelle, les chercheurs ont recruté tous les participants à l’étude après leur admission au service des urgences de l’hôpital Policlinico Umberto I, Université de Rome La Sapienza, entre mars 2020 et avril 2021.

Ils ont recruté quatre patients positifs au test COVID-19, trois présentant une occlusion du gros vaisseau (LVO) – accident vasculaire cérébral ischémique aigu (AIS) et un présentant un infarctus du myocarde aigu (AMI). L’âge moyen des trois patients atteints d’AIS par occlusion du gros vaisseau était de 67 ans, trois étaient des hommes et un patient avait reçu un traitement par thrombolyse intraveineuse. Le quatrième patient ayant subi un IAM était un homme de 43 ans. Lors d’une tomodensitométrie (TDM) pulmonaire, tous les patients COVID-19-positifs présentaient une opacité pulmonaire en verre dépoli.

Le groupe témoin comprenait quatre patients atteints d’IAM sans infection par le SRAS-CoV-2. L’âge moyen des patients du groupe témoin était de 69 ans, et trois des quatre patients avaient reçu une thrombolyse intraveineuse.

Les chercheurs ont récupéré le thrombus de chaque patient par thrombectomie mécanique. Ils ont ensuite fixé les thrombus dans du formol à 10 %, ont coloré leurs sections à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E) et les ont noyées dans de la paraffine.

En outre, les chercheurs ont réalisé une double immunofluorescence afin de colocaliser les plaquettes avec le SP du SRAS-CoV-2 pour les visualiser. Ils ont également extrait l’acide ribonucléique (ARN) du SRAS-CoV-2 des caillots à l’aide d’un kit ARN et ont amplifié l’ARN à l’aide d’un système de transcription inverse-polymérisation en chaîne (RT-PCR) en temps réel pour la détection qualitative de l’ARN.

Arterial thrombi from Covid-19+ patients contain Sars-CoV-2 SP but not N protein Panel 1. Positive immunostaining for SARS-CoV-2 Spike protein (SP) (arrows) in representative thrombotic material from COVID19+ patients, retrieved from cerebral (A) and coronary (C) arteries. Immunohistochemistry for Nucleocapsid protein (NP) was negative in the same samples (B-D). Panel 2. Representative positive immunohistochemical staining for SP (E) and NP (F) (arrows) in the lung of a patient affected by COVID-19 (positive control). Representative negative immunostaining for SP (G) and NP (H) in a thrombus retrieved from the middle cerebral artery of a patient not affected by COVID-19 (negative control). Original magnification 20X. Panel 3. Double immunofluorescence of thrombotic material retrieved from COVID19+ patient cerebral artery. Platelets are stained with antibodies CD61 (red) and SARS-CoV-2 Spike Protein (SP) (green). Overlap of SARS-CoV-2 SP and platelets is shown in yellow (merge).

Les thrombus artériels des patients Covid-19+ contiennent la protéine SP du SRAS-CoV-2 mais pas la protéine N Panel 1. Immunomarquage positif pour la protéine Spike (SP) du SRAS-CoV-2 (flèches) dans du matériel thrombotique représentatif de patients COVID19+, prélevé dans des artères cérébrales (A) et coronaires (C). L’immunohistochimie pour la protéine Nucleocapsid (NP) était négative dans les mêmes échantillons (B-D). Panneau 2. Marquage immunohistochimique positif représentatif pour SP (E) et NP (F) (flèches) dans le poumon d’un patient affecté par COVID-19 (contrôle positif). Immunomarquage négatif représentatif pour SP (G) et NP (H) dans un thrombus prélevé dans l’artère cérébrale moyenne d’un patient non affecté par COVID-19 (contrôle négatif). Grossissement original 20X. Panneau 3. Double immunofluorescence du matériel thrombotique prélevé dans l’artère cérébrale d’un patient COVID19+. Les plaquettes sont colorées avec les anticorps CD61 (rouge) et SARS-CoV-2 Spike Protein (SP) (vert). Le chevauchement de la SP du SARS-CoV-2 et des plaquettes est indiqué en jaune (fusion).

Résultats et conclusion

Les sujets testés et les témoins présentaient des quantités similaires de plaquettes et de globules rouges ou de fibrine. Le thrombus positif au COVID-19 prélevé dans l’artère coronaire descendante antérieure présentait une immunocoloration importante de la SP, tandis que les thrombus positifs au COVID-19 prélevés dans les artères cérébrales présentaient une légère positivité pour la SP. Aucun des thrombus ne présentait de cellules avec NP.

Les auteurs ont noté que la plupart des PS se colocalisaient avec les plaquettes. En revanche, la RT-PCR n’a pas permis de détecter l’ARN du SRAS-CoV-2 dans les trois thrombi positifs au COVID-19.

Selon les auteurs, une autre étude a tenté d’identifier les PS dans les thrombus prélevés chez six patients atteints d’AIS, mais elle n’a pas obtenu de résultats positifs. En revanche, l’étude actuelle a confirmé l’hypothèse selon laquelle les fragments libres de SP, et non le SARS-CoV-2 entier, déclenchent l’activation des plaquettes et la formation de caillots dans le COVID-19. Une explication plausible est que les plaquettes et les cellules endothéliales expriment des récepteurs ACE2 génétiquement différents. Une autre explication pourrait être l’utilisation de différents types d’anticorps polyclonaux anti-SP utilisés dans l’étude actuelle ou le poids variable du COVID-19 sur la pathogenèse de l’AVC.

Laisser un commentaire

Votre adresse e-mail ne sera pas publiée.